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使用方法：
收到細胞小鼠逆轉錄病毒包裝細胞現貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 小鼠逆轉錄病毒包裝細胞現貨供應
簡稱：PT67

種屬：小鼠

來源：逆轉錄病毒包裝細胞；雄性；NIH Swiss

培養基：DMEM

狀態：貼壁

產品規格：

單位：

貨號：AE0724

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Stauntosaponin A  1417887-91-2  中文名：  分子式：C28H38O7  度：97.0%  關鍵詞：    小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Stanozolol  10418-03-8  中文名：康力龍  分子式：C21H32N2O  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Stanolone  521-18-6  中文名：雄諾龍  分子式：C19H30O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠補體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Sprengerinin C  88861-91-0  中文名：  分子式：C44H70O16  度：98.0%  關鍵詞：  ; 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠疊氮胸苷(AZT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Sprengerinin A  88866-99-3  中文名：  分子式：C38H60O12  度：%  關鍵詞：  麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒   小鼠氧化型谷胱甘肽試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠氧化型谷胱甘肽試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠氧化型谷胱甘肽試劑盒、小鼠氧化型谷胱甘肽elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Cholesterol  57-88-5  中文名：膽固醇  分子式：C27H46O 

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Levodopa  中文名：左旋多巴  分子式：C9H11NO4  度：98.0%

小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Levamisole   中文名：鹽酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S  度：98.0%

小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa試劑盒   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Lincomycin  中文名：林可霉素  分子式：C18H34N2O6S 

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Levamisole   中文名：鹽酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S
Eplerenone  107724-20-9  中文名：依普利酮  分子式：C24H30O6    人主要組織相容性復合體Ⅰ類elisa試劑盒   人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒   規格型號：96T/48T   人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人主要組織相容性復合體Ⅰ類試劑盒、人主要組織相容性復合體Ⅰ類 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Flumethasone  2135-17-3  中文名：氟米松  分子式：C22H28F2O5    人軸突生長誘向因子4elisa試劑盒   人軸突生長誘向因子4試劑盒   規格型號：96T/48T   人軸突生長誘向因子4試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人軸突生長誘向因子4試劑盒、人軸突生長誘向因子4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  103335-55-3  中文名：  分子式：C19H29NO3    人軸突生長誘向因子1elisa試劑盒   人軸突生長誘向因子1試劑盒   規格型號：96T/48T   人軸突生長誘向因子1試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人軸突生長誘向因子1試劑盒、人軸突生長誘向因子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  143612-79-7  中文名：  分子式：C13H13ClN2    人周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯吸附測定試劑盒   Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit

5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名：  分子式：C13H15N3O2    人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶聯吸附測定試劑盒   Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit
小鼠逆轉錄病毒包裝細胞現貨供應瓜酸   ELISA.   96T/48T              Emodin  518-82-1  中文名：大黃素  分子式：C15H10O5 

固（ALD）   96T/48T  Ornidazole  中文名：奧硝唑  分子式：C7H10ClN3O3 

固   英文名稱：   Aldosterone   規格：   48T/96T   英文縮寫：   Aldosterone  4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one  446292-10-0  中文名：  分子式：C14H17N3O4 

骨橋素/骨橋蛋白   英文名稱：   Osteopoin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   OPN  Methyl β-D-fructofuranoside  13403-14-0  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6 

骨橋蛋白 ( Osteopoin)   作用：   ELISA   規格：   96T   德國 IBL  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  219921-94-5  中文名：  分子式：C23H37N3O5

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。