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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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BJ5183-AD-1 電擊感受態細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63246
  • 發布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63246
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規格 50ul*5 50ul*50
純度 %
是否進口
規格參數:

產品名稱:BJ5183-AD-1 電擊感受態細胞
規格 :50ul*5 50ul*50
分類:克隆感受態細胞
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項:

1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。
操作方法:
1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

轉染試劑(溶液)質量規格:>95%,分子生物學級Transfection Reagents-Biofection  大鼠細胞因子ELISA檢測試劑盒RatlymphocytefactorELISAKit 96T/48T  石蠟切片結締組織(CONNECTIVETISSUE)馬森(MASSON)染色試劑盒50

反式肉桂醛(>95%BR)質量規格:>95%BRtrans-Cinnamaldehyde  c-sis 試劑盒 Human c-sis ELISA Kit  ELISAKitTn-Ⅰ人肌鈣蛋白規格:48T/96T

富勒烯 C60(),球 C60質量規格:>99.5%(HPLC)Fullerene C60 (pure)  英文名稱MouseU-TSHELISAKit小鼠高靈敏度激素(U-TSH)規格:96T/48T  大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1(>45%BR)質量規格:>45%BRPyrophosphoric acid  冰凍切片組織化學AP酶聯NBT/BCIP間接檢測試劑盒(AP二抗)20  人胃泌素(Gasin)試劑盒 Human Gasin ELISA Kit

犬胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Canine ypsin ELISA Kit  18607-90-4卡枯醇說明書  kakoul  

英文名稱MouseSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit小鼠5-羥色氨(5-HT)規格:96T/48T  58-55-9茶堿品牌  Theophylline

差異相減雜交試劑盒10  34271-54-0茶氨酸規格  Theanine

Ratfreefattyacids,FFAELISA試劑盒大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規格:96T/48T  30462-34-1茶黃素-3-沒食子酸酯  Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G)  

小鼠組蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit  28543-07-9茶黃素-3#146;-沒食子酸酯說明書  Theaflavin-3#146;-Gallate  (TF-3#146;-G)

83-86-3植酸品牌   Phytic acid  組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20

83-67-0可可堿品牌  Theobromine  組織FGFR1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

83-49-8豬去氧膽酸   Hyodeoxycholic acid  組織EPHA3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

83-48-7豆甾醇品牌  Stigmasterol   組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性檢測試劑盒20

BJ5183-AD-1 電擊感受態細胞83-46-5β-谷甾醇說明書  β-Sitosterol   組織D-乳酸比色法定量檢測試劑盒20

聯系方式
手機:13564080845
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